肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）可选择性诱导多种肿瘤细胞凋亡，且对正常细胞毒性较低，是一种极具前景的抗肿瘤候选药物。然而，TRAIL在临床试验中展现的疗效较差。一个重要的原因是TRAIL对肿瘤缺乏靶向性。本研究将拮抗EGFR的亲合体分子与TRAIL融合，得到Z-TRAIL融合蛋白。通过体内外实验得知，Z-TRAIL对肿瘤的靶向能力及杀伤作用较TRAIL明显提升。目前，该蛋白分子及其技术已申请国家发明专利。

 1）本研究设计将亲合体ZEGFR:1907融合在TRAIL的N末端，全基因合成该融合基因插入pQE30载体，得到Z-TRAIL表达质粒。将其导入大肠杆菌中表达纯化，得到Z-TRAIL融合蛋白。通过凝胶过滤层析及动态光散射可知，Z-TRAIL是均一的三聚体。

2）进一步分析Z-TRAIL对肿瘤细胞的选择性杀伤作用以及机制。相比于TRAIL，Z-TRAIL对肿瘤细胞的杀伤能力增强5~20倍；体外结合实验表明Z-TRAIL对EGFR高表达细胞株A431细胞有更强的结合能力。

3）最后研究Z-TRAIL在体内对肿瘤的靶向和杀伤作用。建立EGFR阳性的A431荷瘤鼠模型，静脉注射荧光标记的TRAIL/Z-TRAIL蛋白，荧光成像活体扫描表明，Z-TRAIL在肿瘤组织中的累积明显高于TRAIL。抑瘤实验表明，Z-TRAIL的体内抗肿瘤效果明显强于TRAIL。安全性评价表明，Z-TRAIL对小鼠不产生明显的毒性。

综上所述，本研究将拮抗EGFR的亲合体与TRAIL融合，赋予了TRAIL对EGFR阳性肿瘤的靶向性，显著提升了TRAIL的体内外抗肿瘤作用。获得的Z-TRAIL蛋白分子具有一定的应用前景。